大鼠ELISA試劑盒采納雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被雌激素(E)抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最后的黃色。顏色的深淺和樣品中的雌激素(E)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，計(jì)算樣品濃度。
 

　　大鼠ELISA試劑盒保存在28℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶全溶解后再使用。試驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立刻放回自封袋中，密封(低溫干燥)保存。濃度為0的S0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對比或者空白；依照說明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍，最結(jié)束果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。嚴(yán)格依照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及次序進(jìn)行溫育操作。全部液體組分使用前應(yīng)充分搖勻。
 

　　大鼠ELISA試劑盒一般是可以通過酶標(biāo)儀使用。酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測儀，是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的專用儀器又稱微孔板檢測器?？珊唵蔚胤譃榘胱詣?dòng)和全自動(dòng)兩大類，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一個(gè)比色計(jì)，即用比色法來進(jìn)行分析。測定一般要求測試液的終體積在250μL以下，用一般光電比色計(jì)無法完成測試，因此對酶標(biāo)儀中的光電比色計(jì)有特殊要求。